Aislamiento y caracterización parcial del virus de la leucosis enzoótica bovina en Chile
Resumen
El virus de la leucemia bovina fue aislado desde bovinos naturalmente infectados, en un predio de la Región Metropolitana. Los linfocitos obtenidos de dos bovinos infectados fueron capaces de inducir sincicios específicos en cocultivos con células de bazo, timo y riñón fetal ovino.
El VLB fue obtenido desde sobrenadantes de cultivos de linfocitos, en tiempos cortos, de las vacas infectadas y con linfocitosis persistente. Este sobrenadante fue concentrado por ultracentrifugación, detectando al VLB por inducción de sincicios en riñón fetal ovino y titulando la glicoproteína (gp51) por inmunodifusión doble en gel de agar.
Este aislado (cepa MVC-131-88) resultó ser sensible a la acción de la temperatura disminuyendo su capacidad de inducir sincicios (30%) cuando se conservó a -70ºC por 10 días, y en un 25% cuando se preservó a 4ºC por 45 días. La capacidad infecciosa de la suspensión no se destruyó totalmente si se la sometía a 56ºC por 15 min. El tratamiento con éter y luz ultravioleta eliminaron totalmente la capacidad de inducir sincicios del aislado.
El aislado obtenido además de replicarse en los cultivos de riñón fetal ovino, fue capaz de liberarse a los sobrenadantes y mantenerse en a lo menos 5 subcultivos. Estos resultados indican que las características del aislado (cepa MVC-131-88) son compatibles con las del virus leucemia bovina.
Palabras claves: Virus leucemia bovina, Virología.
Abstract
Bovine leukemia virus (BLV) was isolated, for the first time in Chile, from a naturally infected dairy herd. Viral diagnosis of the isolated (MVC-131-88) was based on the detection of specific syncytia (SIA) on tissue culture of fetal lamb spleen (FLS), kidney and thymus (FLT). The highest sensitivity was observed when cell sheet of 60-70% confluente were inoculated with peripherical lymphocytes or cell-free preparation of BLV, obtained from culture fuids of lymphocytes, naturally infected.
Treatment of cell sheet with a diethylamine-ethyl-dextran prior to BLV inoculation increase syncytia-inductora activity. Cell free BLV preparation decrease in syncytiainducing ability (30%) when was storaged to -70°C or when was heated (56°C, 15 min). Refrigeration (4°C, 45 ds) keep up this ability. Ether treatment, ultraviolet light irradation, destroy the synytia-inducing activity of the isolated. BLV-antigen was detected by agar-gel immunodiffusion in the syncytia-positive monolayer inductor culture. These results indícate that characteristics of MVC-131-88 isolated are compatible with VLB-Ape virus.
Key words: Bovine leukemia virus, Virology.
